三芪口服液对糖尿病肾病大鼠糖酵解、肾脏细胞凋亡及Keap1-Nrf2信号通路的影响

摘要

目的 探讨三芪口服液对糖尿病肾病大鼠糖酵解，肾脏细胞凋亡及Keap1-Nrf2信号通路的影响。方法 将SPF级雄性SD大鼠40只，分为正常组（ZC组）、模型组（M组）、三芪组（S组）、西药组（X组），10只/组。除ZC组外其余大鼠均建立糖尿病肾病（DN）模型，S组进行三芪口服液灌胃、X组进行缬沙坦灌胃，ZC组与M组灌胃等体积生理盐水。使用尿蛋白试剂盒、全自动生化分析仪测量各组小鼠空腹血糖、尿素氮以及肌酐含量，评估肾脏功能。使用ELISA法测定ATP、乳酸、葡萄糖含量；采用HE染色、TUNEL检测法观察肾组织病理程度及肾脏组织凋亡细胞分布及凋亡率情况；Western blot检测Keap1、Nrf2蛋白的表达。结果 （1）与ZC组相比，M组24 h尿微量蛋白、空腹血糖、尿素氮、血肌酐、乳酸、Keap1蛋白升高（P<0.05）,ATP、葡萄糖、Nrf2蛋白降低（P<0.05）。与M组相比，S组ATP、葡萄糖、Nrf2蛋白升高（P<0.05）,24 h尿微量蛋白、空腹血糖、尿素氮、血肌酐、乳酸、Keap1蛋白降低（P<0.05）。与S组相比，X组Keap1蛋白升高、Nrf2蛋白下降（P<0.05）。S组与X组各生化指标、各糖酵解指标对比差异无统计学意义（P > 0.05）;(2)HE染色显示，M组明显肾小球系膜区增宽；S组、X组病变程度减轻，S组最佳；（3）与M组相比，各组肾组织细胞凋亡率下降（P<0.05）,S组最佳；（4）Pearson分析，Keap1与ATP、葡萄糖呈负相关性，与乳酸呈正相关性（P<0.05）;Nrf2与ATP、葡萄糖呈正相关性与与乳酸呈负相关性（P<0.05）。结论 三芪口服液可通过调控Keap1-Nrf2信号通路，改善DN大鼠的糖代谢紊乱与能量供应，最终达到延缓肾功能损伤、减少肾脏细胞凋亡的保护作用。

关键词

三芪口服液 / 糖尿病肾病 / 糖酵解 / 肾脏细胞凋亡 / Keap1-Nrf2信号通路

基金资助

国家自然科学基金(82014779)