雷公藤红素干预Transcription Factor EB介导的溶酶体生物发生障碍抑制白内障形成的分子机制

摘要

目的 探讨雷公藤红素（celastrol,Cel）是否通过激活转录因子EB（transcription factor EB,TFEB）介导的溶酶体生物生成途径，从而抑制白内障的形成。方法 采用H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激模型和亚硒酸盐诱导的大鼠白内障模型，将细胞分为对照组、模型组、Cel干预组、Cel+TFEB siRNA组或Cel+MHY1485组（n=5）;45只仔鼠分为对照组、模型组、Cel低、中、高剂量组（n=9）。采用CCK-8法检测细胞活力；免疫荧光染色观察TFEB核转位；Western blot检测LAMP1、CTSB蛋白表达；LysoTracker Red染色评估溶酶体数量；裂隙灯显微镜观察并分级（Bahmani标准）晶状体混浊程度；HE染色观察晶状体组织形态。同时利用TFEB siRNA和mTOR激活剂（MHY1485）验证Cel的作用机制。结果 与模型组相比，Cel干预组TFEB核转位效率显著提高了约2.1倍（P<0.000 1），显著上调了溶酶体功能相关蛋白的表达（P<0.001）。LysoTracker Red染色显示，Cel干预使H₂O₂诱导的溶酶体数量减少得以逆转（P<0.000 1）。在动物模型中，Cel干预显著降低了晶状体混浊程度（P<0.05）。上述Cel的积极作用均可被TFEB siRNA或mTOR激活剂MHY1485显著拮抗（P<0.001）。结论 Cel通过抑制mTOR信号促进TFEB核转位，增强溶酶体生物发生，改善晶状体蛋白稳态，从而抑制白内障形成。

关键词

雷公藤红素 / 转录因子EB / 溶酶体 / 白内障 / mTOR

基金资助

河北省卫生健康委员会科研项目(20230214)