基于WNT信号通路探究黄芩汤干预结肠上皮细胞炎症模型上皮间质转化的作用机制

摘要

目的 研究黄芩汤（HQT）对结肠上皮细胞炎症模型上皮间质转化进程的影响，并探讨其药效及相关作用机制。方法 使用脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导结肠上皮细胞IEC-6制备炎症模型并分别给予高、中、低剂量(500、250、125μg·mL^-1)黄芩汤干预后，ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）含量，Western-Blot法检测海马无翅基因3A（recombinant wingless type MMTV integration site family member 3A, WNT3A）、β-连环蛋白（β-catenin）、E-钙黏素（E-cadherin）、糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase-3β,GSK3β）、前梯度蛋白2（anterior gradient-2,AGR2）、紧密连接蛋白-1（claudin-1,Cldn-1）的蛋白表达，qRT-PCR法检测WNT3A、β-catenin、E-cadherin、GSK3β、AGR2、Cldn-1的mRNA表达。结果 与模型组相比，黄芩汤组细胞内炎症因子IL-1β、TNF-α含量均明显降低（P<0.01）且存在一定剂量依赖性；黄芩汤组细胞内E-cadherin、GSK-3β蛋白和mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）,β-catenin、AGR2蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）,以高剂量黄芩汤组效果最为显著。结论 黄芩汤可有效遏制炎症环境下结肠上皮细胞中异常的上皮间质转化进程，这一作用机制可能与抑制经典WNT通路中WNT3A、β-catenin、AGR2、Cldn-1表达，同时促进E-cadherin、GSK3β表达有关。

关键词

黄芩汤 / 肠道上皮屏障 / 炎症 / 上皮间质转化 / 作用机制

基金资助

国家自然科学基金青年项目(No.82304690);国家自然科学基金面上项目(No.82074328)