Kcnq1启动子甲基化在骨肉瘤侵袭与顺铂耐药中的作用及机制研究

摘要

目的：探讨Kcnq1在骨肉瘤中的表达变化及其通过启动子甲基化介导的对细胞恶性表型和顺铂（CDDP）敏感性的影响。方法：采用qRT-PCR和免疫组织化学检测骨肉瘤组织及细胞系Kcnq1的表达水平。构建MG-63和顺铂耐药株MG-63/CDD的Kcnq1过表达和沉默模型，检测细胞迁移、侵袭、增殖、凋亡及CDDP敏感性的变化。应用MSP和BSP分析Kcnq1启动子甲基化状态，并通过5-Aza-dC去甲基化处理验证甲基化调控对Kcnq1表达及耐药表型的影响。结果：Kcnq1在骨肉瘤组织及细胞系中显著下调。Kcnq1过表达可抑制MG-63细胞的迁移、侵袭和增殖，并增强CDDP诱导的凋亡，而沉默Kcnq1则产生相反作用。顺铂耐药细胞MG-63/CDDP中Kcnq1启动子呈高甲基化状态，伴随基因表达进一步降低。5-Aza-d去甲基化可显著恢复Kcnq1表达，抑制MG-63/CDDP细胞迁移、侵袭与增殖，并降低IC50，提高顺铂敏感性。结论：Kcnq1在骨肉瘤中下调，其沉默与启动子异常高甲基化密切相关。Kcnq1下调可促进骨肉瘤细胞侵袭与耐药，而解除甲基化能够逆转顺铂耐药表型。Kcnq1作为骨肉瘤表观遗传调控的重要靶点，具有潜在的诊疗应用价值。

关键词

骨肉瘤 / 启动子 / 甲基化 / 耐药 / 靶点