基于Wnt/β-catenin信号通路探讨游泳抑制结直肠癌进展的作用机制

摘要

目的 基于Wnt/β-catenin信号通路探讨游泳抑制结直肠癌（CRC）进展的作用机制。方法 (1)体外实验：将生长状态良好的CT26细胞随机分为阴性对照组（si NC组）和β-catenin敲减组（si β-catenin组），si RNA技术敲减β-catenin基因后，显微镜镜下观察CT26细胞的增殖情况，并对细胞进行计数；Western blot法检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路下游相关因子β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、Axin2蛋白相对表达量。(2)体内实验：选用8周龄健康雄性BALB/c小鼠16只，采用随机数字表法将其分为对照组和游泳组，每组8只。将对照组置于干燥桶中，游泳组置于泳池中进行游泳训练，每周6次，每次30 min，持续3周。处死小鼠并称量小鼠体质量；检测血清中丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酐、尿素氮水平；电子游标卡尺测量肿瘤体积；称量肿瘤体质量并拍照；免疫组织化学法（IHC）检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原（Ki-67）的表达水平；Western blot法检测肿瘤组织中总蛋白p-β-catenin及核蛋白β-catenin相对表达量。结果 与si NC组比较，si β-catenin组镜下细胞数量明显减少（P<0.05）。与si NC组比较，si β-catenin组细胞中β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、Axin2蛋白相对表达量均明显减少（P<0.05）。与对照组比较，游泳组小鼠体质量、血清中丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、肌酐、尿素氮水平差异均无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较，游泳组肿瘤体积明显减小（P<0.05），肿瘤体质量减轻（P<0.05）。与对照组比较，游泳组肿瘤组织中Ki-67的表达明显降低（P<0.05）。与对照组比较，游泳组肿瘤组织中总蛋白p-β-catenin相对表达量升高（P<0.05），核蛋白β-catenin相对表达量明显减少（P<0.05）。结论 本研究表明游泳可通过下调Wnt/β-catenin信号通路抑制小鼠CRC移植瘤的进展，提示游泳有可能作为以β-catenin转位入核介导CRC患者康复的潜在候选疗法。

关键词

结直肠癌 / Wnt/β-catenin信号通路 / 结肠腺癌细胞 / 游泳 / Ki-67