清解扶正颗粒通过TLR4/NF-κB通路对乳腺癌多西他赛联合环磷酰胺化疗所致肠道黏膜损伤的保护作用

摘要

目的 探讨清解扶正颗粒（QFG）对乳腺癌多西他赛联合环磷酰胺化疗所致肠黏膜损伤的保护机制。方法 选择32只雌性BALB/c小鼠接种4T1乳腺癌细胞构建皮下移植瘤模型，瘤体体积50～100 mm³，采用Excel软件随机分为对照组、清解扶正颗粒组（QFG组）、化疗组（TC组）、化疗+清解扶正颗粒组（TC+QFG组），每组8只。对照组以无菌生理盐水灌胃，1次/d；腹腔注射无菌生理盐水，1次/周。QFG组按1 g/kg清解扶正颗粒灌胃，1次/d；腹腔注射无菌生理盐水，1次/周。TC组腹腔注射多西他赛（15 mg/kg）与环磷酰胺（20 mg/kg）,1次/周；无菌生理盐水灌胃，1次/d。TC+QFG组腹腔注射多西他赛和环磷酰胺，1次/周；1 g/kg清解扶正颗粒灌胃，1次/d，灌胃与腹腔注射间隔0.5 h进行。每组干预均持续4周。干预后，观察小鼠体质量、腹泻情况和瘤体体积增长情况；采用HE染色检测回肠黏膜组织形态学改变；采用ELISA法检测血清中二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-LA）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-2、IL-4、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）、分泌型免疫球蛋白A（sIgA）含量；采用TUNEL染色法检测回肠黏膜组织细胞凋亡；采用免疫组织化学检测回肠黏膜组织IgA⁺细胞及肠屏障紧密连接蛋白（ZO-1、Occludin）的表达；采用Western blot法检测回肠黏膜组织TLR4、NF-κB、p-NF-κB蛋白的表达水平。结果 （1）体质量、腹泻评分和瘤体体积：与TC组比较，TC+QFG组干预第27天体质量明显升高（P<0.05），干预第1、8天腹泻评分明显降低（P<0.05）；其余时间点体质量、腹泻评分差异均无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较，TC+QFG组干预第13天及之后的所有时间点瘤体体积均明显减小（P<0.05）。（2）回肠组织病理形态学变化：与TC组比较，TC+QFG组干预后肠黏膜组织结构明显改善，肠黏膜上皮细胞水肿缓解，肠绒毛变高且排列稍规则，隐窝深度变浅，炎细胞浸润减少；TC+QFG组肠绒毛高度、绒毛/隐窝比均明显升高（P<0.05），隐窝深度明显降低（P<0.05）。（3）回肠黏膜组织ZO-1和Occludin蛋白表达水平：与TC组比较，TC+QFG组干预后小鼠回肠黏膜组织ZO-1和Occludin蛋白表达明显增加（P<0.05）。（4）血清DAO、DLA含量：与TC组比较，TC+QFG组干预后血清DAO、D-LA含量明显降低（P<0.05）。（5）血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ含量：与TC组比较，TC+QFG组干预后血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ含量明显降低（P<0.05）,IL-2、IL-4、IL-10含量明显升高（P<0.05）。（6）回肠黏膜组织细胞凋亡：与TC组比较，TC+QFG组干预后细胞核黄染明显减少，染色阳性率明显降低（P<0.05）。（7）血清sIgA含量及回肠黏膜组织IgA⁺细胞数：与TC组比较，TC+QFG组干预后血清sIgA含量和回肠黏膜组织IgA⁺细胞数均明显升高（P<0.05）。（8）回肠黏膜组织TLR4/NF-κB通路蛋白表达水平：与TC组比较，TC+QFG组干预后回肠黏膜组织TLR4和p-NF-κB蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。结论 清解扶正颗粒对乳腺癌化疗所致肠黏膜损伤具有保护作用，可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路抑制炎症反应，减少肠黏膜上皮细胞凋亡，增强肠黏膜上皮屏障及免疫屏障功能。

关键词

乳腺癌 / 肠道黏膜损伤 / 清解扶正颗粒 / 化疗 / TLR4/NF-κB信号通路 / 肠黏膜免疫功能