MAPK信号通路在酒精性脑损伤所致大鼠炎症反应中的作用机制

摘要

目的 探索丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）信号通路在酒精性脑损伤诱发的大鼠神经炎症反应中的调控作用机制，为进一步明确酒精性脑损伤的发病机制提供研究依据。方法 以30只雄性SPF级Wistar大鼠为研究对象，用随机数字表法将大鼠分为对照组、模型组及干预组，给予对照组正常饲养，模型组前两周每日以30%乙醇灌胃，剂量为10 mL/（kg·d）,后4周每日以50%乙醇灌胃，剂量为12 mL/（kg·d）,干预组则在模型组的基础上分别于造模前1 d、造模第2周末、造模第6周末在侧脑室注入5μL浓度为10μmol/L的SB202190溶液。通过改良MNSS评分（modified neurological severity score, MNSS）、Morris水迷宫（morris water maze test, MWMT）及脑组织苏木精—伊红（hematoxylin-eosin, HE）染色评估酒精暴露大鼠的神经功能损伤程度，酶联免疫吸附测定法（ELISA）定量炎症因子TNF-α、NF-κB、IL-1、IL-10的血清浓度变化，免疫荧光染色检测小胶质细胞活化水平，蛋白免疫印迹（Western Blot）测定脑组织MAPK通路分子p-p38 MAPK、p-JNK及p-ERK的蛋白表达情况。结果 对照组、模型组及干预组大鼠在MNSS、 MWMT测试中的表现差异有统计学意义（P<0.05）,模型组大鼠脑损伤明显，干预组有所改善。海马区脑组织HE染色显示模型组细胞结构紊乱，神经元受损，而干预组病变减轻。模型组大鼠脑组织中TNF-α、NF-κB、IL-1、IL-10表达水平及Iba-1⁺小胶质细胞荧光信号强度增强（P<0.05）。Western Blot实验结果显示，模型组p-p38 MAPK、p-JNK和p-ERK的蛋白表达上调，而p38 MAPK抑制剂干预后表达下调（P<0.05）。结论 MAPK信号通路与酒精性脑损伤间存在明显的关联性，通过抑制MAPK信号通路可抑制酒精性脑损伤导致的脑组织炎症因子升高，改善脑组织损伤病理改变及酒精性脑损伤神经功能状态。

关键词

酒精性脑损伤 / 小胶质细胞 / MAPK / 炎症反应