OPA柱前衍生化HPLC测定脑组织还原性谷胱甘肽及谷氨酸含量

摘要

目的 建立检测脑组织中还原性谷胱甘肽（glutathione, GSH）及谷氨酸含量的高效液相色谱（high performance liquid chromatography, HPLC）方法。方法 采用C₁₈色谱柱，以甲醇—乙腈—水和16 mM磷酸盐（pH=8.2）为流动相，柱温38℃等度洗脱，用邻苯二甲醛（O-phthalaldehyde, OPA）为柱前衍生剂，流速1 mL/min,激发波长338 nm,发射波长425 nm,同时检测GSH及谷氨酸含量。结果 GSH及谷氨酸均可以基线分离，在0.25～4.00μg/mL范围内线性关系良好，相关系数分别为0.9994、0.9996,回收率分别为99.71%、99.27%。结论 该方法灵敏可靠。GSH及谷氨酸在大鼠脑组织中的含量分别为（65.05±10.15）、（105.91±39.38）μg/g湿重。

关键词

柱前衍生化 / 高效液相色谱法 / 还原性谷胱甘肽 / 谷氨酸 / 邻苯二甲醛