LncRNA XIST通过竞争性结合miR-497-5p靶向EIF5A促进结肠癌细胞增殖的研究

摘要

目的 探讨长链非编码RNA XIST在结肠癌中的作用，分析其是否通过竞争性结合微小RNA-497-5p(miR-497-5p)靶向真核翻译起始因子5A(eukaryotic initiation factor 5A,EIF5A)调控结肠癌细胞的增殖，以期为探讨结肠癌的机制提供新思路。方法 通过生物信息分析预测XIST在结肠癌中的表达趋势并预测可能的相关靶基因。选择结肠癌SW480细胞株，构建质粒，分别建立pc-DNA-XIST组、si-XIST组、miR-497-5p mimic、miR-497-5p inhibitor组和si-EIF5A组，并设立空载体转染(EV)组，应用CCK-8、qRT-PCR和双荧光素酶报告基因等实验方法，并进行挽救实验。选择结肠癌手术患者47例，留取肿瘤组织作为观察组，留取肿物边缘正常黏膜组织作为对照组，应用qRT-PCR法检测LncRNA XIST和miR-497-5p,应用免疫组化法检测EIF5A的表达。结果 生信分析预测到LncRNA XIST在结肠癌中具有高表达趋势，且LncRNA XIST与miR-497-5p、miR-497-5p与EIF5A有能结合的碱基序列。CCK-8结果显示，与EV组比较，si-XIST组、miR-497-5p mimic组和si-EIF5A组细胞增殖活性明显下降，pc-DNA-XIST组、miR-497-5p inhibitor组细胞增殖活性明显升高，双荧光素酶报告基因实验显示LncRNA XIST和miR-497-5p、miR-497-5p和EIF5A具有靶向关系。挽救实验显示抑制miR-497-5p可部分逆转沉默LncRNA XIST和沉默EIF5A对结肠癌细胞增殖的抑制作用。结肠腺癌中LncRNA XIST和EIF5A表达升高，miR-497-5p表达下调。结论 LncRNA XIST在结肠癌形成和进展中有促进作用，LncRNA XIST通过竞争性结合miR-497-5p靶向EIF5A促进结肠癌细胞的增殖。

关键词

结肠癌 / 长链非编码RNA XIST / miR-497-5p / EIF5A / 增殖