羽扇豆醇通过Th2细胞因子减轻慢性哮喘小鼠气道炎症和黏液高分泌的实验研究

摘要

目的 探讨羽扇豆醇(lupeol, LUP)对哮喘小鼠气道炎症水平和气道黏液高分泌影响及其潜在的分子机制。方法 选择成年雄性小鼠，采用随机数字表法平均分为4组(n=8),包括Control组、卵清蛋白(ovalbumin, OVA)组(OVA组)、OVA+LUP-低剂量组(OVA+L-LUP组)和OVA+LUP-高剂量组(OVA+H-LUP组)。采用OVA雾化建立小鼠哮喘模型。在干预75 d后处死小鼠，获取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)和肺组织标本。采用苏木素—伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色和过碘酸雪夫(periodic acid schiff, PAS)染色对肺组织病理学改变和黏液分泌进行分析；采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测BALF中白介素4(interleukin-4,IL-4)、白介素5(interleukin-5,IL-5)和白介素13(interleukin-13,IL-13)水平；采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测肺组织粘蛋白5AC(Mucin 5AC,MUC5AC)、胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin, TSLP)、IL-4、IL-5和IL-13的mRNA水平。结果 在OVA雾化干预75 d后，HE染色显示哮喘小鼠气道及周围组织出现明显的炎性细胞浸润，PAS染色显示哮喘小鼠气道怀状细胞及黏液明显增多；BALF中细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数、淋巴细胞数及嗜酸性粒细胞数均明显升高(P<0.05);BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平明显增加；肺组织MUC5AC、TSLP、IL-4、IL-5和IL-13的mRNA水平明显升高(P<0.05)。与OVA组相比较，OVA+L-LUP组和OVA+H-LUP组各指标均更低(P<0.05)。同时，与OVA+L-LUP组相比较，OVA+H-LUP组各指标均更低(P<0.05)。结论 综上所述，羽扇豆醇可以通过下调Th2炎症因子合成与释放，缓解OVA诱导的慢性哮喘小鼠气道炎症反应。该研究为羽扇豆醇应用于哮喘的临床治疗奠定了理论基础。

关键词

羽扇豆醇 / 支气管哮喘 / 黏液高分泌 / 气道炎症 / Th2细胞因子