N-乙酰半胱氨酸通过调控Bax/Bcl-2信号通路减轻脑缺血再灌注损伤

摘要

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine, NAC)对脑缺血再灌注损伤小鼠的神经保护作用及其机制。方法 利用线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型。雄性昆明小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)和NAC组(150 mg/kg),每组15只。各组小鼠于再灌注24 h后进行神经功能缺损评分；激光散斑血流成像仪观察各组小鼠脑血流恢复情况；氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色检测小鼠脑梗死体积；免疫荧光法检测脑组织神经元特异性核蛋白(neuron-specific nuclear protein, NeuN)的表达情况；末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法评估小鼠缺血侧细胞的凋亡；蛋白印迹法(Western Blotting)检测各组小鼠脑组织B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bcl2-Associated X,Bax)和Bcl-2的表达水平。结果 与Sham组相比，MCAO组神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑缺血侧TUNEL阳性细胞数、Bax蛋白表达水平均明显增加(P<0.05);脑缺血侧血流灌注量、NeuN阳性细胞数、Bcl-2蛋白的表达水平明显降低(P<0.05),Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05)。与MCAO组相比，NAC组神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑缺血侧TUNEL阳性细胞数、Bax蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);脑缺血侧血流灌注量、NeuN阳性细胞数、Bcl-2蛋白的表达水平明显升高(P<0.05),Bax/Bcl-2比值降低(P<0.05)。结论 NAC可有效改善小鼠脑缺血再灌注后引起的损伤，拯救缺血侧神经元，减少损伤处的细胞凋亡，其机制可能与Bax/Bcl-2信号通路有关。

关键词

N-乙酰半胱氨酸 / 脑缺血再灌注 / 细胞凋亡 / Bax/Bcl-2信号通路