1,3-β-葡聚糖通过增强RIPK1介导的泛凋亡激活小鼠巨噬细胞RAW264.7的炎性反应

摘要

目的 观察1,3-β-葡聚糖对小鼠巨噬细胞的损伤作用及其潜在机制。方法 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)采用1,3-β-葡聚糖诱导6 h构建细胞模型。分别采用不同浓度的1,3-β-葡聚糖处理细胞，进行细胞计数并采用CCK8测定细胞活力以确定终浓度；采用RT-PCR法检测细胞炎症因子、泛凋亡激活器RIPK1及泛凋亡相关基因(Caspase-1、Caspase-3、GSDMD、MLKL)的表达；采用Western Blotting法和免疫荧光法检测泛凋亡激活器RIPK1及泛凋亡相关蛋白(MLKL、GSDMD、Bcl-2和ASC)的表达。结果 50 mg/L的1,3-β-葡聚糖能显著促进RAW264.7细胞的死亡；与对照组相比，实验组细胞炎症因子IL-6、IL-18的表达显著增加，泛凋亡激活器RIPK1的表达显著增加，泛凋亡相关基因Caspase-1、Caspase-3、GSDMD和MLKL的表达均显著增加。泛凋亡相关蛋白GSDMD、MLKL的表达上调；Bcl-2的表达下调，差异具有统计学意义(P<0.01);沉默RIPK1后，GSR组细胞炎症因子IL-6、IL-18的表达显著下降。在免疫荧光检测中，与对照组相比，实验组细胞中MLKL、ASC的表达显著增加，Bcl-2的表达下调。结论 1,3-β-葡聚糖通过增强RIPK1介导的泛凋亡激活小鼠巨噬细胞RAW264.7的炎性反应。

关键词

1,3-β-葡聚糖 / 巨噬细胞 / 泛凋亡

基金资助

辽宁省科技厅博士启动项目,项目编号：303202401010