KOH蚀刻结合TEG缓冲液热诱导抗原修复的Pon812树脂切片免疫组化染色方法

摘要

目的 探讨KOH联合三甘醇(triethyleneglycol, TEG)缓冲液对Pon812树脂包埋的切片进行脱树脂处理后行免疫组织化学染色的可能性，尝试获得精确清晰的免疫组化染色结果。方法 取Pon812树脂包埋的肾脏组织半薄切片(0.5μm),用KOH溶液蚀刻掉组织切片上的树脂。切片经乙醇梯度水化后，用TEG缓冲液进行抗原修复，5%BSA封闭30 min。然后按照常规免疫组织化学步骤进行水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)、Cubilin和Megalin染色，显色后观察表达情况。阳性对照组采用石蜡包埋的切片行免疫组化检查。结果 树脂包埋切片免疫组织化学染色基本和石蜡切片一致，而且树脂切片的表达部位显示得十分清晰精确。结论 树脂包埋切片脱树脂后可以进行免疫组织化学染色。采用KOH蚀刻结合TEG缓冲液热诱导抗原修复技术能够较好地暴露和保留抗原，对AQP1、Cubilin、Megalin等膜抗原可获得定位清晰、准确和分辨率较高的阳性表达。

关键词

肾 / 免疫组织化学 / 半薄切片 / 树脂包埋 / 抗原修复