双氢青蒿素通过AMPK/SIRT1通路缓解小鼠结肠炎的作用机制

摘要

目的 本研究通过体内外实验探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)调控葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)诱导小鼠结肠炎的作用机制。方法 体内实验采用3%DSS饮用水构建小鼠结肠炎模型，将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组及DHA治疗组。实验期间每日监测小鼠体重变化、大便性状及便血情况以计算疾病活动指数(disease activity index, DAI)。实验终点测量结肠长度，采用苏木精—伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色评估结肠组织病理损伤程度，并使用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测外周血血清中促炎和抗炎因子水平。体外实验使用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导PMA分化的人单核细胞白血病(tohoku hospital pediatrics-1,THP-1)细胞构建M1型巨噬细胞炎症模型，并设置腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)抑制剂(compound C,CC)干预组以验证机制。利用免疫荧光技术检测M1型标志物分化簇86(cluster of differentiation 86,CD86)及沉默信息调节因子1(SIRT1)的表达。结果 体内研究显示，与模型组相比，DHA治疗显著缓解了小鼠的结肠炎症状，表现为体重下降减缓、DAI评分降低，结肠缩短现象得到明显改善。组织病理学分析证实，DHA有效减轻了结肠、隐窝破坏及炎性细胞浸润，同时血清中促炎因子水平显著下调。体外研究发现，DHA处理显著抑制了LPS诱导的THP-1细胞CD86的高表达。关键性机制验证结果显示，加入AMPK抑制剂后，DHA对SIRT1的激活作用被阻断，同时其对CD86表达的抑制效应被显著逆转，细胞重现高炎症状态。结论 本研究证实DHA能有效缓解DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎，减轻肠道病理损伤并抑制肠道局部及外周血炎症反应。

关键词

青蒿素 / 模型 / 组织病理学 / 炎症