穿心莲内酯通过激活线粒体凋亡途径增强非小细胞肺癌PC9/GR细胞对吉非替尼敏感性的作用

王陈晨; 赵潞东; 刘美靖; 杨文强; 刘莹

锦州医科大学学报 ›› 2026, Vol. 47 ›› Issue (4) : 42 -48.

王陈晨, 赵潞东, 刘美靖, 杨文强, 刘莹

作者信息 +

Author information +

文章历史 +

摘要

目的利用耐吉非替尼的非小细胞肺癌PC9/GR细胞株，探讨穿心莲内酯(andrographolide, Andro)激活线粒体凋亡途径增强PC9/GR细胞对吉非替尼(gefetinib, Gef)敏感性的作用。方法 Gef单独用药或Gef与Andro联合用药，通过CCK8法检测各组细胞存活率，确定后续实验用药浓度。将PC9/G细胞随机分为对照组、Gef组、Andro+Gef组、Andro组。药物处理24 h或48 h后，CCK-8实验检测细胞的增殖活性；Hoechst33342染色，荧光显微镜观察细胞核形态变化；应用流式细胞术分析细胞的凋亡；利用Western Blotting检测细胞凋亡相关蛋白的表达；应用Q-PCR法检测凋亡相关基因的表达。结果 CCK-8检测结果表明，与单独给药组比较，Andro+Gef联合用药组能够显著抑制PC9/GR细胞的增殖。Hoechst33342荧光染色观察结果显示，Gef组细胞核完整，染色质分布均匀，呈弥散均匀的淡蓝荧光；而联合用药组大部分细胞核皱缩，染色质分布不均匀，并呈现致密的浓染，部分呈现颗粒状分布。流式分析结果表明，与Gef单用组相比，联合用药组PC9/GR细胞凋亡比例均明显增加。Western Blotting检测结果表明，与Gef单用组相比，联合给药组促凋亡分子Cleaved caspase-3和Bax的表达显著升高，而抑凋亡蛋白Bcl-2的表达明显降低(P<0.001)。Q-PCR检测结果表明，与Gef单用组相比，联合给药组Caspase-3、Bax和p53的表达显著升高(P<0.001),Bcl-2的表达明显降低(P<0.001)。结论 Andro与Gef联合具有协同作用，联合用药能够时间和剂量依赖性的诱导PC9/GR细胞凋亡，抑制细胞增殖。Andro与Gef联合可能通过激活内源性线粒体细胞凋亡途径，增强PC9/GR细胞对吉非替尼的敏感性。