血管生成素-2通过膜突蛋白介导内皮细胞通透性增高

摘要

目的 探讨血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)对内皮细胞通透性的影响及其潜在分子机制。方法 内皮细胞培养于Transwell培养皿，给予Ang-2(200 ng/mL)刺激0、12、24和48 h后检测内皮细胞通透性变化；内皮细胞接种到6孔板，Ang-2刺激0、15、30和60 min后检测膜突蛋白（Moesin）的磷酸化；使用moesin siRNA特异性敲低moesin后，给予Ang-2刺激，检测内皮细胞通透性的改变，并进一步利用免疫荧光染色检测内皮细胞F-actin以及血管内皮-钙黏蛋白（Vascular endothelial cadherin,VE-cadherin）的变化。结果 Ang-2(200 ng/mL)刺激内皮细胞0、12、24和48 h后，细胞通透性以时间依赖的方式逐渐增高；Ang-2显著增加内皮细胞moesin磷酸化，而使用Ang-2受体Tie-2的中和抗体Anti-Tie-2处理细胞后，显著抑制了Ang-2介导的moesin磷酸化；Moesin的特异性敲除显著抑制了Ang-2介导的内皮细胞通透性增高、F-actin应力纤维的形成以及VE-cadherin的破坏。结论 Ang-2通过moesin介导内皮细胞通透性增高。

关键词

血管生成素-2 / 膜突蛋白 / 内皮细胞通透性