BK_Ca在高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤中的作用及机制

摘要

目的 探讨大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channel,BK_Ca)在糖尿病肾病中的作用及其机制。方法 （1）用激动剂NS11021和抑制剂Tet及BK_Ca-siRNA干预后观察糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）细胞模型的细胞增殖率、上清液中Ⅳ型胶原蛋白（collagenⅣ，ColⅣ）及纤连蛋白（fibronectin,FN）的表达变化，揭示BK_Ca的作用；（2）用激动剂NS11021和抑制剂Tet及BK_Ca-siRNA干预后观察DN细胞模型TGF-β₁、Smad2/3的含量变化；用激动剂TGF-β₁、抑制剂SB431542干预TGF-β₁/Smad2/3信号通路后，观察BK_Ca作用的变化，揭示BK_Ca作用与该信号通路相关性。结果 （1）与高糖组比较，药理学激动BK_Ca使模型细胞BK_Caβ亚基蛋白表达增加、细胞增殖率增高，差异均具有统计学意义（P <0.05）；与高糖组比较，药理学和基因抑制BK_Ca，使其α、β亚基蛋白表达减少，从而出现模型细胞增殖率下降、ColⅣ和FN分泌明显减少（P <0.01）。（2）与高糖组比较，药理学激动BK_Ca引起Smad2/3含量增高，药理学和基因抑制BK_Ca，引起TGF-β₁、Smad2/3含量明显降低，差异均具有统计学意义（P <0.05）；与NS11021组比较，用SB431542阻断TGF-β₁/Smad2/3信号通路后，细胞增殖率明显降低，ColⅣ和FN分泌减少，差异均具有统计学意义（P <0.05）。结论 高糖诱导的DN细胞模型存在BK_Ca高表达，抑制BK_Ca后细胞增殖率、ColⅣ和FN的分泌明显降低，从而改善DN病变，此作用与TGF-β₁/Smad2/3信号通路相关。

关键词

糖尿病肾病 / 大电导钙激活钾通道 / 胶原Ⅳ / 纤连蛋白 / TGF-β₁ / Smad2/3