柴黄清胰活血颗粒对雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞损伤的保护作用及机制

摘要

目的 观察柴黄清胰活血颗粒对雨蛙素（caerulein）诱导的大鼠胰腺腺泡细胞损伤的保护作用，并探讨柴黄清胰活血颗粒对JAK2/STAT3信号通路的调控机制。方法 取对数生长期的AR42J细胞，通过CCK-8法检测不同浓度柴黄清胰活血颗粒对AR42J细胞活性的影响并筛选最佳药物干预浓度；用雨蛙素刺激细胞6 h构建胰腺炎体外模型；随机分为空白对照组、模型组、柴黄清胰活血颗粒低、中、高剂量组（0.5、1、2 mg/mL）;ELISA法测定细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β的表达；实时荧光定量PCR测定各组细胞JAK2、STAT3基因表达水平；Western blot法检测各组细胞JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平。结果 CCK-8法检测发现，当药物浓度为0.5、1及2 mg/mL时，平均细胞存活率均大于100%;ELISA检测发现，与空白组相比，模型组炎性细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α升高，提示AR42J细胞急性胰腺炎模型的成功建立；与模型组相比，柴黄清胰活血颗粒组（0.5、1、2 mg/mL）IL-6、IL-1β、TNF-α明显降低，差异具有统计学意义（P <0.05）；实时荧光定量PCR检测发现，与模型组相比，柴黄清胰活血颗粒组（0.5、1、2 mg/mL）STAT3 mRNA、柴黄清胰活血颗粒组（2 mg/mL）JAK2 mRNA表达水平显著下降（P <0.05）;westen blot测定发现，与模型组相比，柴黄清胰活血颗粒组（0.5、1、2 mg/mL）p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白相对表达量显著下降（P <0.05）。结论 柴黄清胰活血颗粒可能通过调控JAK2/STAT3信号通路中关键分子表达，从而减轻AR42J细胞炎症反应。

关键词

柴黄清胰活血颗粒 / JAK2/STAT3信号通路 / AR42J细胞 / 急性胰腺炎