G蛋白偶联胆汁酸受体1通过抑制内质网应激减轻内皮素-1介导的乳鼠心肌细胞凋亡

摘要

目的 观察G蛋白偶联胆汁酸受体1（G protein-coupled bile acid receptor 1,TGR5）被激活后对内皮素-1(endothelin-1,ET-1介导的心肌细胞凋亡的作用，并探讨其机制。方法 首先分对照组和ET-1组，ET-1浓度分别为10^-6、10^-7、10^-8 mmol/L，分别培养12、24、36、48 h，流式细胞术检测各组各时段凋亡率。选择凋亡率较高的ET-1浓度及时间，进行后续实验。后续实验分为对照组、ET-1组、TGR5激动组、TGR5表达抑制组、TGR5空病毒组，流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡率，CCK-8测心肌细胞存活率，RT-PCR检测TGR5mRNA,Western blot检测TGR5、C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun-N-terminal protein kinase,JNK）、磷酸化JNK（phosphorylated JNK,p-JNK）及门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（casepase-12）表达。结果 ET-1在10^-8～10^-6 mmol/L的浓度范围呈浓度依赖性，48 h内呈时间依赖性介导心肌细胞凋亡（P <0.05）。后续实验发现激活TGR5后，相较于ET-1组，心肌细胞凋亡率下降，心肌细胞存活率提高，且CHOP、p-JNK、Caspase12蛋白表达受到抑制（P <0.05）。而抑制TGR5表达后可阻断TGR5对心肌细胞凋亡的抑制作用，降低心肌细胞存活率，CHOP、p-JNK、Caspase12蛋白表达增加（P <0.05）。结论 ET-1可介导心肌细胞凋亡，其机制可能与内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）过度激活有关，而TGR5可能通过抑制ERS，拮抗ET-1对心肌细胞介导的凋亡作用。

关键词

G蛋白偶联胆汁酸受体1 / 心肌细胞凋亡 / 内皮素-1 / 内质网应激