黑色素瘤细胞裂解物通过巨噬细胞抗原递呈诱导淋巴细胞活化体外实验

摘要

目的 探讨巨噬细胞对黑色素瘤细胞裂解物抗原的抗原递呈作用。方法 反复冻融法制备小鼠B16F10黑色素瘤细胞裂解物抗原，根据其浓度的不同分为4组：对照组、25μg/mL组、50μg/mL组和100μg/mL组，分别作用于C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞，流式细胞术检测巨噬细胞MHC-Ⅰ分子H-2Kb/H-2Db和MHC-Ⅱ分子I-A/I-E以及协同刺激分子CD80和CD86的表达。制备C57BL/6小鼠免疫淋巴细胞，与上述巨噬细胞共培养，收集未贴壁淋巴细胞，再与B16F10黑色素瘤细胞共培养，CCK8法检测淋巴细胞增殖率和黑色素瘤细胞增殖抑制率。结果 几乎所有巨噬细胞均阳性表达H-2Kb/H-2Db,各组间差异无统计学意义(P>0.05);而与对照组相比，100μg/mL组H-2Kb/H-2Db表达强度明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比，25μg/mL组、50μg/mL组和100μg/mL组的I-A/I-E阳性表达率、CD80和CD86阳性表达率以及淋巴细胞对B16F10黑色素瘤细胞的增殖抑制率增高，差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比，50μg/mL组和100μg/mL组的淋巴细胞增殖率增高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 巨噬细胞对黑色素瘤细胞裂解物抗原具有抗原递呈作用，可诱导淋巴细胞的抗黑色素瘤免疫反应。

关键词

黑色素瘤 / MHC / 协同刺激分子 / 淋巴细胞活化 / 抗原递呈 / 抗肿瘤免疫

基金资助

承德市科技计划项目(202204A155)