产酸性蛋白酶阿氏普里斯特菌的筛选及产酶条件优化

摘要

酸性蛋白酶是重要的酶制剂，应用广泛且需求量大，但我国产酸性蛋白酶菌种单一。因此，开发新型高产酸性蛋白酶菌株尤为重要。通过透明圈法进行初筛，并使用福林酚法测定酶活进行复筛，采用形态学观察、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析，对菌株进行鉴定。以酸性蛋白酶酶活为指标，利用单因素和响应面法对菌株产酶条件进行优化，得到最佳产酶条件。研究从土壤中筛选出一株产酸性蛋白酶的菌株，经鉴定为阿氏普里斯特菌（Priestia aryabhattai），并将其命名为CD28。当玉米浆粉添加量为质量分数2%、大豆分离蛋白添加量为质量分数2.5%、培养时间48 h、培养温度34℃、初始pH 5、装液量体积分数16%、接种量体积分数3%时，该菌株产酸性蛋白酶活力达到218.43 U/mL。P. aryabhattai CD28具有较强产酸性蛋白酶能力，经优化后菌株产酶量提升了3.53倍，为后续酶学性质研究及应用奠定基础。

关键词

阿氏普里斯特菌 / 菌株筛选 / 酸性蛋白酶 / 产酶条件优化

基金资助

国家自然科学基金资助项目（32102270）; 江苏省高等学校重点自然科学基金项目（20KJA550001）; 江苏省“333”高层次人才培养工程项目; 江苏省海洋生物资源与环境重点实验室开放基金（SH20191204）; 江苏省研究生科研与实践创新计划项目（KYCX2023＿127）; 江苏省高等学校大学生创新创业训练计划项目（SY202311641638004）