CXCL8和MMP9在雌二醇诱导的肾透明细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及机制研究

摘要

目的 明确CXCL8和MMP9在雌二醇（E2）诱导的786-O和Caki-1细胞增殖、迁移和侵袭过程中的关键作用，并探讨其潜在分子机制及临床预后价值。方法 CCK8实验检测不同浓度（0、10、50、100、500 nmol/L）和不同时间（0、12、24、48、72 h）下E2对786-O和Caki-1细胞增殖的影响。利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析CXCL8和MMP9在肾透明细胞癌（ccRCC）患者中的表达水平与生存率的关系。随后，设计特异性siRNA靶向敲低CXCL8和MMP9基因，实验分组包括Control组（未处理）、E2组（100 nmol/L）、E2+si-NC组（阴性对照）、E2+si-CXCL8组、E2+si-MMP9组及E2+siCXCL8/si-MMP9组（联合敲低）。采用qRT-PCR和Western blotting检测各组CXCL8和MMP9的表达水平，并通过CCK8和Transwell实验评估细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 E2在100 nmol/L浓度并作用48 h时显著促进786-O和Caki-1细胞增殖（P<0.000 1），且未见明显细胞毒性。Kaplan-Meier生存分析显示，在ccRCC患者中，高表达CXCL8和MMP9与较差的总生存率相关，也与无病生存率下降显著相关（P<0.05）。qRT-PCR和Western blotting结果显示，E2处理显著上调CXCL8和MMP9的表达水平。敲低CXCL8或MMP9后，E2诱导的细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著下降（P<0.000 1），其中MMP9敲低的抑制效果更为明显。联合敲低CXCL8和MMP9进一步抑制细胞增殖、迁移和侵袭，且抑制效果优于单敲组（P<0.001）。结论 CXCL8和MMP9在E2诱导的786-O和Caki-1细胞增殖、迁移和侵袭过程中起重要作用，且两者协同影响ccRCC进展。此外，生存分析表明，CXCL8和MMP9的高表达与ccRCC患者的不良预后相关，提示其可能作为ccRCC预后评估的生物标志物，并为靶向治疗提供新的研究方向。

关键词

雌二醇 / 肾透明细胞癌 / C-X-C基序趋化因子配体8 / 基质金属蛋白酶-9 / 细胞增殖 / 迁移 / 侵袭