不同注射条件下AAV9载体对小鼠肌肉的短期转导效果

摘要

目的 观察不同注射方式和注射剂量下腺相关病毒9型（AAV9）载体对小鼠肌肉的短期转导效果，初步寻找治疗杜氏肌营养不良症（DMD）安全有效的基因转导方式。方法 使用AAV9包装携带荧光素酶报告基因的质粒构建AAV9-Luc病毒载体，经尾静脉注射和肌肉注射两种方式，分别向雌性BALB/c小鼠体内注射不同剂量的AAV9-Luc, 3 d后于生物荧光成像仪下观察小鼠体内荧光表达情况，进而分析病毒在小鼠体内的分布情况。结果 经尾静脉注射时，病毒在小鼠体内分布较为均匀广泛；而经肌肉注射时，除在注射部位有表达外，其他肌肉组织也有少量表达，但注射部位表达强度最高。此外，病毒在体内的分布随剂量增高而愈广泛，表达也随剂量增高而愈强烈。当肌肉注射剂量为1.26×10¹³μg/kg时，病毒仅在注射部位附近及四肢、膈肌等肌肉组织中有表达，其他脏器表达不明显。结论 在AAV9载体介导基因治疗DMD的技术中，低剂量(1.70×10¹¹μg/只，1.26×10¹³μg/kg)肌肉注射是较为合适的转导方式。

关键词

杜氏肌营养不良症 / 腺相关病毒9型 / 基因治疗 / 生物分布 / 肌肉