绿针假单胞菌Rhs-P27的杀线活性及对松材线虫病的防效研究

摘要

松材线虫病（pine wilt disease,PWD）严重威胁中国松林生态健康，利用微生物资源开展生物防治是绿色防控的重要途径。本研究结合形态学观察与16S rDNA序列分析，对油松Pinus tabuliformis Carrière根际土壤细菌RhsP27进行鉴定；研究该菌株对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus(Steiner&Buhrer)Nickle的影响和对松材线虫病的防治效果。结果表明，Rhs-P27的16S rDNA序列与绿针假单胞菌Pseudomonas chlororaphis(Guignard&Sauvageau)Bergey的同源性达98%以上，因此将其鉴定为绿针假单胞菌。Rhs-P27发酵菌悬液（Bacterial fermentation suspension,BFS）和发酵滤液原液（Bacterial fermentation filtrate,BFF）对松材线虫均表现出极强的毒杀活性，经这两种液体处理后的线虫繁殖系数分别是-0.41和0.79，产卵量约为对照的0.01和0.03倍；经油红O染色发现，Rhs-P27可破坏松材线虫体内的脂滴形态，使其粒径显著减小。盆栽试验对Rhs-P27的防治效果评估表明，使用Rhs-P27发酵菌悬液进行预防性注干处理，能有效减轻松材线虫病的症状，接种线虫后35 d的防效可达54.17%；松苗体内的线虫密度显著降低，仅为对照的0.41倍，且该处理诱导油松苗体内过氧化氢酶（catalase,CAT）、多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia-lyase,PAL）的活性提升。本研究揭示了绿针假单胞菌Rhs-P27在松材线虫病防控中具有显著的生物防治潜力，可为该病害高效绿色防控技术研究提供理论基础和菌种资源。

关键词

松材线虫病 / 生防菌 / 绿针假单胞菌 / 毒杀活性 / 生防效果