血管紧张素转化酶2：乳酸的一个潜在靶点

摘要

目的：探讨血管紧张素转化酶2(Angiotensin converting enzyme 2, ACE2)在L-乳酸和D-乳酸条件下的蛋白功能影响及其效应机制。方法：通过AlphaFold2对ACE2进行了蛋白结构预测，将ACE2分别与L-乳酸、D-乳酸、丙酮酸和MLN-4760进行分子对接模拟分析，其中MLN-4760为ACE2的特异性抑制剂，作为本研究的阳性对照。基于分子对接模拟分析结果，使用ACE2活性荧光检测试剂盒检测L-乳酸和D-乳酸对ACE2酶活性的影响。对HEK-293细胞进行常规培养，同时转染RBD-Flag和ACE2-HA质粒后分别用L-乳酸和MLN-4760处理，co-IP检测RBD与ACE2的结合水平。结果：对接结果显示L-乳酸和D-乳酸结合在ACE2的氯离子结合位点，体外酶活性测定发现L-乳酸和D-乳酸均能够以浓度依赖性抑制ACE2酶活性，L-乳酸对ACE2的抑制作用较D-乳酸强，丙酮酸对ACE2活性无显著影响。ACE2是介导SARS-CoV-2入侵细胞的关键受体，co-IP实验结果发现，L-乳酸能够增强SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD和ACE2结合，而ACE2抑制剂MLN-4760对RBD与ACE2的结合无显著影响。结论：L-乳酸能够抑制ACE2酶活性，并促进RBD与ACE2结合。

关键词

乳酸 / 血管紧张素转换酶2 / 肾素-血管紧张素-醛固酮系统 / 糖尿病 / 高血压