利用荧光素酶报告基因法研究转录因子USF1结合调控马鹿MicroRNA PC-5p-4811基因启动子机制

野生动物学报 ›› 2025, Vol. 46 ›› Issue (01) : 63 -71.

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摘要

为了探究转录因子上游刺激因子1(USF1)调控马鹿（Cervus elaphus）microRNA PC-5p-4811(miR-4811)基因转录的机理，综合运用核心启动子和转录因子结合位点生物信息学预测分析、基因克隆、点突变和双荧光素酶报告基因法等技术研究USF1结合miR-4811启动子分子机制和功能。结果显示：（1）截切突变证实马鹿miR-4811基因的核心启动子位于上游-3 174～-2 966 bp;(2)转录因子USF1在-3 378～+73 bp区域共有2个DNA结合位点（-3 046～-3 031 bp、-3 045～-3 018 bp），均位于miR-4811核心启动子内；（3）USF1作为激活因子可直接结合上述位点激活miR-4811核心启动子上调双荧光素酶报告基因转录表达。研究结果揭示了USF1参与调节microRNA基因转录表达的机理，并为后续USF1/miR-4811调节轴参与调控鹿茸再生发育机制提供了重要基础数据。