右美托咪定调控巨噬细胞TLR4/ACOD1免疫代谢偶联减轻小鼠急性肺损伤实验研究

Dexmedetomidine alleviates acute lung injury in mice by regulating Toll-like receptor 4/aconitate decarboxylase 1 immune metabolism coupling in macrophages: an experimental study

摘要

目的 探究右美托咪定（Dexmedetomidine，DEX）调控巨噬细胞Toll样受体-4（toll-like receptors-4，TLR4）/乌头酸脱羧酶（aconitate decarboxylase 1，ACOD1）免疫代谢偶联对小鼠肺损伤的影响。 方法 将RAW264.7细胞分为Control、LPS、LPS+DEX 3组，应用Western blot、ELISA实验检测TLR4、ACOD1与促炎细胞因子蛋白表达。将C57 BL/6小鼠分为Control、盲肠结扎穿刺术（cecal ligation and puncture，CLP）、CLP+DEX 3组，实验探究小鼠7 d生存率、肺损伤情况，同时检测肺组织中TLR4、ACOD1表达，以及与肺泡巨噬细胞、外周血中促炎因子蛋白表达情况。随后，在Acod1全身性敲除小鼠（Acod1^-/- ）中检测CLP+DEX治疗后肺损伤情况与野生型（wild type，WT）小鼠CLP+DEX治疗后的变化。最后提取WT与Acod1^-/- 小鼠骨髓来源巨噬细胞（bone marrow-derived macrophages，BMDM），检测巨噬细胞iNOS表达情况。 结果 LPS刺激RAW264.7后，TLR4、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）与白细胞介素（interleukin，IL）-6蛋白表达升高，DEX治疗后降低。体内实验中，DEX治疗降低了CLP诱导的ARDS/ALI模型小鼠7 d死亡率、弥漫性肺泡损伤、肺水肿以及外周血中促炎细胞因子TNF-α与IL-6的表达，还降低了肺组织与肺泡巨噬细胞中iNOS的表达。DEX也降低了CLP小鼠肺组织内TLR4的表达。而Acod1基因的敲除逆转了DEX的治疗效果，使肺损伤加重，使BMDM细胞表达iNOS增强。 结论 右美托咪定可调控巨噬细胞TLR4/ACOD1免疫代谢偶联，降低LPS刺激后的巨噬细胞炎症因子释放，同时减轻小鼠急性肺损伤。

关键词

急性呼吸窘迫综合征 / 巨噬细胞 / 右美托咪定 / 乌头酸脱羧酶

Key words

acute respiratory distress syndrome / macrophages / dexmedetomidine / aconitate decarboxylase 1