TRPV1介导小胶质细胞自噬在带状疱疹后神经疼痛中的作用和分子机制

摘要

目的：探究瞬时感受器电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)介导小胶质细胞自噬在带状疱疹后神经疼痛中的作用机制。方法：40只小鼠随机分为正常组（Con）、带状疱疹后神经痛组（postherpetic neuralgia,PHN）、阴性对照组（PHN-sh-NC）、TRPV1干扰组（PHN-sh-TRPV1），每组10只。检测小鼠机械缩足阈值（mechanical withdrawal threshold,MWT）和热痛阈潜伏期（thermal withdrawal latency,TWL）;ELISA检测血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）水平；透射电镜检测脊髓组织中自噬体形成；免疫荧光检测脊髓组织中微管相关蛋白轻链3(microtubuleassociated protein 1 light chain 3,LC3)、离子钙结合适配器分子1(ionized calcium-binding adapter molecule 1,Iba-1)表达；Western blot检测脊髓组织中Beclin-1、自噬微管相关蛋白轻链3β(microtubule-associated protein 1 light chain 3 beta,LC3B)、类似核孔糖蛋白p62(similar to nuclear pore glycoprotein p62,p62)蛋白表达。结果：和Con组相比，PHN组和PHN-sh-NC组小鼠、血清BNDF(t=10.49,P<0.001)水平及脊髓组织中p62(P=0.004)蛋白表达明显降低，小鼠血清中TNF-α(t=26.27,P<0.001)、IL-1β(t=17.0,P<0.001)、IL-6(t=25.48,P<0.001)水平及脊髓组织中Iba-1(P=0.002)、LC3(P<0.001)表达和Beclin-1(P=0.001)、LC3B(P<0.001)蛋白表达明显升高；和PHN组相比，PHN-sh-TRPV1组小鼠MWT、血清BNDF(t=5.174,P<0.001)水平及脊髓组织中p62(P<0.001)蛋白表达明显升高；TWL、血清中TNF-α(t=20.57,P<0.001)、IL-1β(t=8.260,P<0.001)和IL-6(t=19.81,P<0.001)水平及脊髓组织中Iba-1(P<0.001)、LC3(P=0.001)表达和LC3B(P<0.001)、Beclin-1(P<0.001)蛋白表达明显降低。结论：PHN小鼠脊髓小胶质细胞自噬激活，抑制TRPV1表达可通过抑制小胶质细胞自噬缓解带状疱疹后神经痛小鼠的疼痛。

关键词

瞬时感受器电位香草酸亚型1 / 小胶质细胞自噬 / 带状疱疹后神经疼痛