凋亡外囊泡传递LncRNA-XIST在胶质瘤细胞耐药性作用机制研究

摘要

目的：探讨胶质瘤细胞来源的凋亡外囊泡（apoptotic cell-derived extracellular vesicles,apoEVs）对胶质瘤肿瘤发生和替莫唑胺（temozolomide,TMZ）耐药性的影响及作用机制。方法：经提取的apoEVs经纳米颗粒跟踪分析和透射电子显微镜表征，并通过Western blot、流式细胞术、CCK-8实验、细胞克隆形成实验和Transwell实验等方法评估其对细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。结果：apoEVs促进胶质瘤细胞的TMZ耐药性，显著提高TMZ半数抑制浓度（IC50）(t=9.326,P=0.001)，抑制细胞凋亡，并通过外泌体抑制剂GW4869逆转该效应。apoEVs促进胶质瘤细胞的迁移和侵袭，增加波形蛋白（Vimentin）和Twist蛋白的表达（t=8.762,P=0.002和t=7.941,P=0.004），抑制裂解型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(leaved-Caspase-3)的表达（t=9.217,P=0.002）。进一步机制研究表明，apoEVs通过调控LncRNA-XIST/miR-29c/O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O6-methylguanineDNA methyltransferase,MGMT）轴，影响胶质瘤细胞对TMZ的耐药性。沉默LncRNA-XIST降低MGMT表达、增加miR-29c表达，从而增强TMZ敏感性，抑制细胞迁移和侵袭。结论：胶质瘤细胞来源的凋亡外囊泡通过传递LncRNA-XIST调节miR-29c/MGMT轴从而促进胶质瘤恶性进展和替莫唑胺耐药。

关键词

胶质瘤 / 凋亡外囊泡 / 长链非编码RNA-X染色体失活转录物 / 上皮-间质转化 / miR-29c/O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶轴