METTL3介导m⁶A修饰lncRNA SNHG5对骨肉瘤MG-63细胞增殖和侵袭的影响

摘要

目的：探讨m⁶A甲基化转移酶3（methyltransferase 3,METTL3）在人骨肉瘤组织中的表达及其对MG-63细胞增殖和侵袭的影响。方法：采用定量PCR和蛋白印迹检测METTL3在5对人骨肉瘤中的表达水平及其对下游lncRNA小核仁核糖核酸宿主基因5（small nucleolar RNA host gene 5,SNHG5）和Wnt-β-catenin信号通路的影响；甲基化RNA免疫共沉淀（methylated RNA immunoprecipitation,MeRIP）检测METTL3敲低对lncRNA SNHG5的m⁶A水平影响；CCK-8和Transwell实验检测细胞增殖和侵袭；蛋白印迹检测Wnt-β-catenin信号通路的活性变化。结果：与癌旁正常组织相比，METTL3在人骨肉瘤组织中的mRNA（P=0.034）和蛋白水平（P=0.002）均可升高；敲低METTL3能减少lncRNA SNHG5的m⁶A水平（P=0.027）及其mRNA水平（P=0.002）。功能上，敲低METTL3抑制MG-63细胞的增殖（P=0.014）和侵袭（P=0.001），并抑制Wnt1,Wnt3a,Wnt10a,β-catenin和C-myc的蛋白表达水平（均P<0.01），而SNHG5过表达促进细胞增殖（P=0.027）和侵袭（P=0.006），激活Wnt-β-catenin信号通路（均P<0.01），并逆转METTL3敲低引起的抗肿瘤作用（均P<0.01）。结论：METTL3介导m⁶A修饰lncRNA SNHG5和激活Wnt-β-catenin信号促进骨肉瘤MG-63细胞增殖和侵袭的作用。

关键词

甲基化转移酶3 / 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5 / 骨肉瘤 / 增殖 / 侵袭