当归芍药散调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路减轻溃疡性结肠炎大鼠结肠损伤的机制研究

摘要

目的：探究当归芍药散（Danggui Shaoyao powder,DGSYP）对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）大鼠Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的影响。方法：将48只SD雄性大鼠随机分为6组，正常组、模型组、DGSYP低剂量组（11.61 g/kg）、中剂量组（23.22 g/kg）、高剂量组（46.44 g/kg）及柳氮磺吡啶组（0.36 g/kg），每组8只。除正常组外，其余各组用5%三硝基苯磺酸钠（sodium trinitrobenzene sulfonate,TNBS）诱导，构建UC大鼠模型。成功建模后，各治疗组持续给药14 d，正常组与模型组给予等量生理盐水。计算大鼠疾病活动指数（disease activity index,DAI）评分；苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色，对大鼠结肠组织病理学变化展开观察。酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）结肠中白细胞介素（interleukin,IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)含量。借助实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）和蛋白免疫印迹（Western blot,WB）检测结肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平。结果：对比正常组，模型组大鼠DAI评分上升，结肠缩短，组织病理变化明显，结肠组织中炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平明显升高（P<0.01）,TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA和蛋白表达也明显提高（P<0.05、P<0.01）。与模型组相比，DGSYP各治疗组大鼠上述疾病相关状况均得到改善，DAI分数明显下降（P<0.05），结肠增长，未见明显水肿或水肿程度减轻，结肠组织病理情况均有不同程度改善；炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平明显降低（P<0.01）,TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平明显下降（P<0.05、P<0.01）。结论：DGSYP能够对TLR4/MyD88/NF-κB信号通路发挥调控作用，减少炎症因子释放量，缓解UC大鼠结肠炎性损伤程度。

关键词

溃疡性结肠炎 / 当归芍药散 / Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子-κB信号通路 / 三硝基苯磺酸钠