hnRNPA2B1介导m⁶A修饰MIR100HG促进胃癌MKN-28细胞增殖和侵袭作用

摘要

目的：探讨N⁶-甲基腺苷（N⁶-methyladenosine,m⁶A）阅读子异质核糖核蛋白A2/B1（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNPA2B1）在人胃癌组织中的表达及其对人胃癌细胞系MKN-28（human gastric carinoma cell line MKN-28,MKN-28）增殖和侵袭的影响。方法：利用癌症基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）和基因表达数据集（gene expression omnibus,GEO）分析hnRNPA2B1和长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）miR-100-let-7a-2-miR-125b-1簇宿主基因（miR-100-let-7a-2-miR-125b-1 cluster host gene,MIR100HG）在胃癌组织的表达及其与患者临床生存预后的关系。实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qPCR）和蛋白质印迹法（Western blot）检测hnRNPA2B1对MIR100HG表达水平及其下游Wnt/β-连环蛋白信号通路（Wnt/β-catenin signaling pathway,Wnt/β-catenin）的影响；甲基化RNA免疫共沉淀（methylated RNA immunoprecipitation,MeRIP）检测MIR100HG的m⁶A水平；细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）和Transwell小室实验检测细胞增殖和侵袭。结果：与癌旁组织相比，hnRNPA2B1和MIR100HG在人胃癌组织的表达均升高（t=6.101,P<0.001;t=2.191,P=0.037），且其高表达与胃癌患者预后不良显著相关。敲低hnRNPA2B1减少MIR100HG的mRNA表达水平（t=5.156,P=0.007）及其m⁶A水平（t=4.789,P=0.010）。敲低hnRNPA2B1抑制MKN-28细胞的增殖（t=4.915,P=0.008）和侵袭（t=5.167,P=0.007），并阻断Wnt/β-catenin信号通路的活性（均P<0.05）；而过表达MIR100HG促进细胞增殖（t=3.578,P=0.023）和侵袭（t=8.411,P=0.001），激活Wnt/β-catenin信号通路（均P<0.01），并逆转hnRNPA2B1敲低引起的抗肿瘤作用（t=3.667,P=0.021）。结论：hnRNPA2B1介导m⁶A修饰MIR100HG和激活Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌MKN-28细胞增殖和侵袭的作用。

关键词

异质核糖核蛋白A2/B1 / 胃癌 / 增殖