CLEC7A调节PD-L1促进卵巢癌生长的作用及机制研究

摘要

目的 明确C型凝集素结构域家族7成员（CLEC7A）在高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）中的作用及相应的机制。方法 通过癌症基因组图谱-卵巢癌（TCGA-OV）数据集，结合转录调控网络与主调控因子分析（MRA），明确HGSOC中CLEC7A基因对免疫相关基因的作用；通过通路富集分析与验证，确定了CLEC7A对酪氨酸激酶（JAK）/信号转导及转录激活因子3（STAT3）通路的调节机制。分析GSE184880单细胞测序数据集，揭示了CLEC7A低表达与高表达的HGSOC中免疫细胞的比例和细胞通信的差异。收集2017年1月至2022年12月在中国科学技术大学附属第一医院/安徽省立医院确诊并行手术治疗的70例HGSOC和70例卵巢透明细胞癌（OCCC）患者的石蜡肿瘤组织和对应癌旁组织以及临床病理资料，比较HGSOC与OCCC预后相关因素的差异；利用免疫组织化学染色法，检测CLEC7A和PD-L1在HGSOC和OCCC及对应的癌旁组织中的表达水平。构建CLEC7A的短发夹RNA（shRNA）载体，检测CLEC7A抑制后HGSOC细胞增殖和凋亡的变化。在CLEC7A高表达的小鼠肿瘤模型中，观察髓系免疫抑制细胞（MDSC）、CD8⁺T细胞的比例以及MDSC的功能变化。结果 转录调控网络分析显示，叉头框蛋白P3（FOXP3）与CLEC7A对免疫相关基因均起到调节作用，CLEC7A不仅与患者总体生存率相关，还在HGSOC肿瘤组织中呈现高表达（均P <0.05）。敲低CLEC7A后，不仅促进了细胞凋亡，还抑制了HGSOC细胞系的体内外增殖（均P <0.05）。CLEC7A通过JAK/STAT3信号通路调控程序性死亡配体-1（PD-L1）的表达。在CLEC7A高表达的肿瘤组织中，CD8⁺T细胞的比例下降，MDSC的比例上升，且MDSC的功能得到增强（均P <0.05）。结论 HGSOC中CLEC7A诱导了PD-L1的表达，且促进了HGSOC的增殖与免疫抑制信号通路的激活，可能导致HGSOC的恶性生长。

关键词

C型凝集素结构域家族7成员 / 高级别浆液性卵巢癌 / 程序性死亡配体-1 / JAK/STAT3通路 / 肿瘤免疫