金黄色葡萄球菌与乳腺癌细胞上皮间质转化的相关性研究

摘要

目的 探究金黄色葡萄球菌（S. aureus）侵染对乳腺癌细胞体外生长的影响及其机制。方法 收集2016年11月至2022年11月大连医科大学附属第二医院乳腺外科留取的20株无菌体液S.aureus感染菌株和人三阴性乳腺癌231细胞株（MDA-MB-231），通过聚合酶链反应（PCR）扩增检测S. aureus的毒力基因表达率；采用共培养确定S.aureus的最佳感染复数（MOI）并观察S.aureus与MDA-MB-231细胞共生能力；通过黏附实验及电子透射显微镜观察S. aureus与MDA-MB-231细胞的黏附特性及内化过程。通过划痕实验、Transwell小室迁移实验和细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测S.aureus侵染对MDA-MB-231细胞迁移和增殖能力的影响。采用蛋白免疫印迹法和免疫荧光实验分析S.aureus侵染后MDA-MB-231细胞的上皮间质转化（EMT）通路相关蛋白活性的表达变化。结果 20株菌株的4种毒力基因携带率分别为clfA(95%), LuED(75%)、 fnbB(50%)、 fnbA(95%)。共生及黏附实验表明S. aureus与MDA-MB-231细胞具有黏附特性并能稳定共生。透射电子显微镜观察到S. aureus能够成功侵染MDA-MB-231细胞并内化。划痕实验、Transwell小室迁移实验和CCK-8实验结果显示，S.aureus侵染对MDA-MB-231细胞的增殖和迁移具有抑制作用。蛋白免疫印迹法和免疫荧光实验结果表明，EMT相关蛋白E-cadherin的表达升高，而Ncadherin、Vimentin和总β-catenin的表达降低（均P<0.05）。结论 S.aureus侵染抑制了MDA-MB-231细胞的增殖和迁移能力，并通过抑制EMT过程抑制了MDA-MB-231细胞的转移。

关键词

金黄色葡萄球菌 / 上皮间质转化 / 细胞迁移 / MDA-MB-231细胞