全氟辛烷磺酸对人胎盘合体滋养细胞影响的研究

摘要

目的 研究全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate, PFOS)对人胎盘合体滋养细胞中糖皮质激素代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型(11β-HSD2)和胎盘合体滋养细胞凋亡的影响，探讨PFOS对胎儿的影响。方法 利用改良的Kliman法分离提纯原代人胎盘滋养层细胞，体外培养3 d,待滋养层细胞完全合体化为合体滋养细胞后，使用不同浓度的PFOS(0、0.001、0.01、0.1、1、10μmol/L)处理细胞，利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹等方法检测PFOS对胎盘合体滋养细胞11β-HSD2的mRNA和蛋白质表达水平，以及酶活性的影响，检测PFOS对天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase3)蛋白质表达水平和酶活性的影响。结果 体外培养第1、2、3天，胎盘滋养层细胞中11β-HSD2的mRNA和蛋白质相对表达量逐渐升高，与未处理时(即第0天)比较的差异具有统计学意义(P值均<0.01)。0.01μmol/L PFOS处理的人胎盘合体滋养细胞11β-HSD2的mRNA和蛋白质相对表达量较未处理时显著降低，且11β-HSD2的mRNA和蛋白质相对表达量随着PFOS剂量的增加(0.1、1、10μmol/L)显著降低(P值均<0.01)。0.01μmol/L PFOS处理的人胎盘合体滋养细胞11β-HSD2酶活性较未处理时显著降低，并随着PFOS剂量的增加，活性抑制程度显著增强(P值均<0.01)。0.01μmol/L PFOS处理的人胎盘合体滋养细胞pro-caspase3蛋白质相对表达量较未处理时显著降低，且蛋白质相对表达量随着PFOS剂量的增加(0.1、1、10μmol/L)显著降低(P值均<0.01)。同时，0.01μmol/L PFOS处理的人胎盘合体滋养细胞cleaved-caspase3的蛋白质相对表达量较未处理时显著升高，并随着PFOS剂量的增加显著升高(P值均<0.01)。进一步实验结果显示，0.01μmol/L PFOS处理的人胎盘合体滋养细胞caspase3的酶活性较未处理时显著增强，并随着PFOS剂量的增加活性显著增强(P值均<0.05)。结论 PFOS能够呈浓度依赖性地抑制人胎盘合体滋养细胞中11β-HSD2的表达和酶活性，促进胎盘合体滋养细胞凋亡，这可能是PFOS导致病理妊娠，对胎儿产生不良影响的重要机制之一。

关键词

全氟辛烷磺酸 / 胎盘合体滋养细胞 / 11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型 / 凋亡