巨噬细胞转录因子阴阳1基因通过调节脂肪细胞因子影响胰岛素敏感性

摘要

目的 探讨巨噬细胞转录因子阴阳1（YY1）基因对葡萄糖耐量、胰岛素敏感性的影响。方法 通过Cre-Loxp系统，成功获得巨噬细胞YY1基因特异性敲除(YY1^f/f;lyz2-cre)小鼠。高脂喂养小鼠12～13周，检测小鼠葡萄糖耐量（血糖水平）和胰岛素耐量（相对血糖值）。将高脂喂养的YY1基因敲除小鼠(实验组，YY1^f/f;lyz2-cre)与对照组(YY1^f/f)小鼠分别注射0.9%氯化钠溶液和胰岛素（剂量均为0.75 U/kg）,取其附睾脂肪、肌肉、肝脏组织，采用免疫印迹法检测蛋白激酶B（Akt）-糖原合成酶激酶3β（Gsk3β）通路关键蛋白（Akt、Gsk3β）的磷酸化水平。采用ELISA法检测高脂饮食后实验组小鼠与对照组小鼠血清胰岛素、脂联素和瘦素水平。应用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测正常饮食的两组小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM）中炎症因子mRNA相对表达量。结果 琼脂糖凝胶电泳见700 bp处显示条带，表明lyz2-cre基因成功表达。实验组小鼠BMDM中，YY1基因mRNA相对表达量显著低于对照组，表明巨噬细胞YY1基因特异性敲除小鼠模型构建成功。高脂喂养下，实验组小鼠注射葡萄糖后60、90 min时的血糖水平均显著低于对照组同时间点（P值均<0.05）,实验组小鼠注射胰岛素后30、60、90 min时的相对血糖值均显著低于对照组同时间点（P值分别<0.05、0.001、0.01）。正常饮食喂养下，两组各时间点间血糖水平和相对血糖值的差异均无统计学意义（P值均>0.05）。实验组小鼠附睾脂肪中胰岛素信号通路关键蛋白Akt及Gsk3β磷酸化水平较对照组均明显上调，肌肉和肝脏组织中无明显变化。实验组小鼠血清瘦素、脂联素水平均显著高于对照组（P值均<0.05）;实验组小鼠血清胰岛素水平较对照组有下降趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。实验组小鼠BMDM中IL-6 mRNA、TNF-α mRNA、IL-1β mRNA相对表达量均显著低于对照组（P值均<0.001）。结论 巨噬细胞转录因子YY1基因敲除，可以通过减轻巨噬细胞炎症，上调脂联素表达，增强脂肪组织胰岛素敏感性，从而改善高脂饮食小鼠的胰岛素抵抗。

关键词

阴阳1转录因子 / 炎症 / 巨噬细胞 / 胰岛素敏感性 / 脂联素