微核糖核酸-125a通过调控细胞凋亡和炎症反应延缓阿尔茨海默病进展的研究

摘要

目的 探究微核糖核酸-125a(mircoRNA-125a,简称miR-125a)在PC12阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)细胞模型中，对细胞凋亡、总神经突生长和炎症因子水平的影响。方法 采用Aβ1-42毒化神经生长因子诱导的PC12细胞株构建PC12 AD模型细胞，采用荧光定量聚合酶链式反应检测miR-125a相对表达量。将miR-125a模拟物(mimic)、对照mimic、miR-125a抑制剂(inhibitor)和对照inhibitor转染至PC12 AD模型细胞后，统计Hoechst 33342阳性细胞数和碘化丙啶阳性细胞数，计算细胞凋亡率；于显微镜下观察细胞形态，计算总神经突生长长度；采用ELISA法测定细胞上清液中炎症因子水平。结果 Aβ1-42组miR-125a相对表达量显著少于对照组(P<0.05)。miR-125a mimic组细胞凋亡率为(7.55±1.56)%,显著低于对照mimic组的(13.00±1.11)%(P<0.05);miR-125a inhibitor组细胞凋亡率为(19.34±2.41)%,显著高于对照inhibitor组的(13.11±2.04)%(P<0.01)。miR-125a mimic组中乳酸脱氢酶(LDH)毒性细胞比例为(6.14±1.20)%,显著低于对照mimic组的(15.43±2.55)%(P<0.05);miR-125a inhibitor组中LDH毒性细胞比例为(23.07±3.86)%,显著高于对照inhibitor的(14.79±2.26)%(P<0.05)。miR-125a mimic组总神经突生长长度为(34.54±2.95)μm,较对照mimic组的(23.93±2.64)μm显著增长(P<0.01)。miR-125a inhibitor组总神经突生长长度为(18.47±2.27)μm,较对照inhibitor组的(24.62±1.52)μm显著缩短(P<0.05)。miR-125a mimic组中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17水平较对照mimic组均显著降低(P<0.01或0.001)。miR-125a inhibitor组中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17水平较对照inhibitor组均显著增高(P<0.05或0.01)。miR-125a mimic组中脑源性神经营养因子(BDNF) mRNA和蛋白质相对表达量均较对照mimic组显著增加(P值均<0.01)。miR-125a inhibitor组中BDNF mRNA和蛋白质相对表达量均相较对照inhibitor组显著减少(P值均<0.01)。结论 miR-125a可能对Aβ1-42毒化的分化PC12细胞株具有保护作用。

关键词

阿尔茨海默病 / 微核糖核酸-125a / 总神经突生长长度 / 细胞凋亡 / 炎症