hsa＿circ＿0010697在胃癌发生、发展和转移中的作用及机制

摘要

目的 探讨hsa＿circ＿0010697在胃癌中的表达水平及发生、发展过程中可能的分子机制。方法 从美国生物技术信息中心数据库中查询hsa＿circ＿0010697基因序列，合成慢病毒载体；制备胃癌细胞SGC-7901。设置3组。对照组：胃癌细胞SGC-7901,未转染慢病毒载体。shRNA-NC组：空载体（慢病毒载体）转染胃癌细胞SGC-7901。hsa＿circ＿0010697-shRNA组：hsa＿circ＿0010697慢病毒载体转染胃癌细胞SGC-7901。采用qRT-PCR检测3组hsa＿circ＿0010697基因在胃癌细胞SGC-7901中的表达，采用CCK-8法检测3组细胞增殖活性[以波长为450 nm处的吸光度(A₄₅₀)值表示],Tranwell实验检测3组细胞迁移和侵袭能力（穿透基质膜到达下室的细胞数量）,Western blot检测3组细胞RAS-ERK信号通路上的RAS、细胞外调节蛋白激酶（ERK）1/2、细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、E2F转录因子1（E2F1）的蛋白质相对表达量。取6周龄雄性SPF级裸鼠6只，随机分入shRNA-NC组、hsa＿circ＿0010697-shRNA组，每组3只，检测两组裸鼠的体重和种瘤体积。结果 qRT-PCR结果显示，hsa＿circ＿0010697-shRNA组hsa＿circ＿0010697基因相对表达量为1.423±0.109,显著高于对照组的0.994±0.172和shRNA-NC组的1.006±0.137（P值均<0.05）。CCK-8法检测细胞增殖结果显示，hsa＿circ＿0010697-shRNA组细胞A₄₅₀值为0.757±0.051,显著低于对照组的1.000±0.044和shRNA-NC组的0.981±0.054（P值均<0.05）。Transwell实验结果显示，hsa＿circ＿0010697-shRNA组穿透基质膜到达下室的细胞数量为（93±11）个，显著少于对照组的（165±16）个和shRNA-NC组的（152±15）个（P值均<0.05）。Western blot结果显示，hsa＿circ＿0010697-shRNA组RAS-ERK信号通路上的RAS、ERK1/2、CDK4、Cyclin D1、E2F1蛋白质相对表达量显著高于对照组和shRNA-NC组（P值均<0.05）。裸鼠移植瘤模型实验结果显示，饲养12、18、22、24 d时，hsa＿circ＿0010697-shRNA组裸鼠的体重均显著大于shRNA-NC组同时间（P值均<0.05）;饲养22、24 d时，hsa＿circ＿0010697-shRNA组裸鼠种瘤体积均显著小于shRNA-NC同时间（P值均<0.05）。结论 hsa＿circ＿0010697可以在胃癌诊治中作为一种潜在生物标志物和治疗靶点，为胃癌的药物靶向治策略提供了新思路。

关键词

胃肿瘤 / SGC-7901细胞 / hsa＿circ＿0010697基因 / 细胞增殖