麻疯树核糖体失活蛋白Curcin和Curcin C的RNA N-糖苷酶活性研究

摘要

为探究麻疯树核糖体失活蛋白的RNA N-糖苷酶活性，本研究建立了UPLC-MS/MS方法测定麻疯树核糖体失活蛋白Curcin、Curcin C的体外RNA N-糖苷酶脱嘌呤活性.通过单因素实验得到Curcin与RNA32脱嘌呤反应时，反应的最适条件为37℃、pH=4.2、反应时间为4 h.当Curcin C与RNA32脱嘌呤反应时，反应的最适条件为37℃、pH=3.7、反应时间为8 h. Curcin的Km值为8.231μmol/L,Curcin C的Km值为3.302μmol/L，说明Curcin C与底物的亲和力更大.部分金属离子对CurcinC的酶活性具有促进作用，而对Curcin而言均产生了抑制.腺苷浓度达到250μmol/L时，Curcin C酶活性升高，而对于Curcin没有影响.当酶促反应底物为RNA14和RNA32时，Curcin C蛋白的RNA N-糖苷酶活性都显著高于Curcin，表明Curcin C相较于Curcin更具有抗肿瘤药物开发潜力.

关键词

核糖体失活蛋白 / Curcin / Curcin C / RNA N-糖苷酶活性 / UPLC-MS