Sirt3在BMSCs成骨成脂双向命运分化调控的作用

摘要

为探究Sirt3(Sirtuin 3)对骨形成过程中BMSCs成骨成脂双向分化的调控作用以及影响因素，本文通过组织学方式以及体外细胞培养的方式两种方式进行检测和验证.利用6个月的野生型小鼠和Sirt3基因敲除小鼠的长骨骨髓进行组织学切片染色，对骨髓中的成骨标志物Osterix进行免疫荧光染色，以及对成脂标志物Cebpα和Pparγ进行免疫荧光染色.同时观察Sirt3敲除对骨髓中炎症标志物IL-1β、IL-6、TNF-α的影响.同时对从小鼠骨髓提取出的BMSCs原代培养后，通过ELISA检测炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量.成骨诱导后，通过碱性磷酸酶活性检测和茜素红染色，以及Western blot检测ALP、RUNX2、OCN的蛋白表达情况，探究Sirt3敲除对成骨分化的影响.而在成脂诱导BMSCs后，通过油红O染色和Western blot检测Cebpα和Pparγ的蛋白表达情况，研究Sirt3敲除对成脂分化的影响.以上结果表明敲除Sirt3基因会导致成年小鼠成骨降低成脂增加的不同方向分化的趋势，同时发现Sirt3敲除后炎症因子分泌显著上调，因此炎症可能作为Sirt3调控BMSCs成骨成脂双向命运分化的机制之一.

关键词

Sirt3 / 成骨分化 / 成脂分化 / 炎症 / 骨髓间充质干细胞