藏红花CsMYB93基因的克隆及其在抗尖孢镰刀菌中的功能

摘要

为探究藏红花CsMYB93转录因子是否在抵御尖孢镰刀菌侵染中发挥作用，本研究以藏红花球茎为实验材料，克隆了CsMYB93基因，对其进行生物信息学分析，采用实时荧光定量PCR技术，分析CsMYB93在尖孢镰刀菌侵染胁迫下的时空表达特异性。结果显示，CsMYB93转录因子为MYB家族的R2R3型转录因子，其编码区（CDS）全长为834 bp，编码277个氨基酸。预测分析发现CsMYB93为不稳定的亲水性蛋白，不含跨膜片段和信号肽，属于内源型的非跨膜蛋白。CsMYB93具有两个保守的MYB结构域，并且在其C末端147～264位氨基酸区域存在一个甜蛋白THN结构域，而THN蛋白通常具有抗菌活性。系统发育分析表明CsMYB93与拟南芥AtMYB93、AtMYB92、AtMYB53蛋白具有同源性。在尖孢镰刀菌侵染的藏红花球茎中，通过qRT-PCR检测到CsMYB93的相对表达量显著上调，且在根中相对表达量最高。此外，将CsMYB 93在本氏烟草中进行瞬时过表达，接种尖孢镰刀菌后，过表达CsMYB93的烟草叶片病斑面积显著减小，相关防御基因表达量上调。综合以上结果，推测CsMYB93转录因子在藏红花球茎抵御尖孢镰刀菌侵染中发挥正向调控作用。

关键词

藏红花 / 尖孢镰刀菌 / CsMYB93转录因子 / 基因克隆与表达分析

基金资助

国家中医药管理局全国中药资源普查项目(GZY-KJS-2018-004); 香料植物资源开发与利用四川省高校重点实验室开放基金资助项目(2016XLZ002); 四川大学植物标本数字化平台建设及共享(2012JCPT004)