清乳化岩煎对动物乳腺肿瘤的保护作用及其机制研究

摘要

旨在探讨中药复方清乳化岩煎(QD)对动物乳腺肿瘤的保护作用及机制。检测清乳化岩煎对正常细胞(HC11、RAW264.7、DC2.4)的安全浓度，探究其对乳腺癌细胞(A72、CMT-U27、4T1)体外增殖的抑制作用；流式细胞术检测4T1细胞凋亡情况。将BALB/c小鼠分为空白对照组，模型组及清乳化岩煎低、中和高剂量组(100、200和400 mg/kg),除空白对照组外，其余小鼠皮下注射4T1细胞建立乳腺癌转移瘤模型，各组灌胃相应药物14 d,期间记录肿瘤体积和生长状况，检测脾脏淋巴细胞增殖情况，观察肿瘤组织病理变化，缺口末端标记(TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡水平，免疫组化(IHC)法检测肿瘤组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)与热休克蛋白70(HSP70)蛋白表达，ELISA法测定肿瘤组织和血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果显示：当清乳化岩煎浓度大于或等于5 mg/mL时，对A27、4T1细胞的增殖存在显著抑制(P<0.001);浓度大于或等于10 mg/mL时，对CMT-U27细胞呈现出显著性抑制(P<0.001);不同浓度的清乳化岩煎均可诱导4T1细胞凋亡(P<0.001)。与模型组相比，清乳化岩煎能够显著减小肿瘤体积(P<0.001),促进肿瘤细胞坏死，改善肿瘤对周围组织的影响，促进脾脏淋巴细胞增殖(P<0.001),促进肿瘤组织的细胞凋亡(P<0.001),显著降低肿瘤组织中MMP-9和HSP70蛋白表达(P<0.05),清乳化岩煎组小鼠血清和肿瘤组织中IFN-γ和TNF-α水平显著上升(P<0.05),IL-10含量显著下降(P<0.05)。研究表明，清乳化岩煎可通过调控细胞凋亡和增强机体免疫来抑制乳腺癌的发展，为中药治疗动物乳腺癌提供理论依据。

关键词

清乳化岩煎 / 乳腺癌 / 凋亡 / 免疫增强