日本脑炎病毒感染宿主后m~6A甲基化相关蛋白的表达和定位研究

摘要

为了研究日本脑炎病毒(JEV)感染宿主后在体内外对m~6A甲基化相关蛋白表达和定位的影响，本试验建立了JEV感染的C57BL/6小鼠模型及乳仓鼠肾细胞(BHK-21)模型，检测JEV感染后小鼠的脑、肾及BHK-21细胞的m~6A修饰水平，通过蛋白免疫印迹检测小鼠脑、肾以及JEV感染不同时间点的细胞中m~6A相关蛋白的表达水平，共聚焦显微镜观察JEV感染细胞的m~6A相关蛋白的亚细胞定位变化。结果显示：与对照组相比，感染JEV后m~6A修饰水平极显著上升(P<0.01);感染JEV的小鼠脑、肾中m~6A甲基转移酶样蛋白(METTL)3表达量大幅上升，细胞中METTL3表达量随感染时间推移而逐渐增加；METTL3和METTL14的亚细胞定位发生改变，大量由细胞核转移至细胞质。综上所述，JEV可使体内外的m~6A水平和METTL3的表达水平上升，细胞中METTL3和METTL14的亚细胞定位改变，表明JEV的感染与m~6A修饰具有较强的关联性，为进一步研究m~6A及其相关蛋白调控JEV复制的机制奠定了基础。

关键词

日本脑炎病毒 / m~6A甲基化 / 甲基转移酶样蛋白3 / 亚细胞定位