牛轮状病毒多克隆抗体制备及特性分析

摘要

旨在优化G6P[1]型牛轮状病毒(bovine rotavirus, BRV)在MARC-145细胞中的培养条件，制备其兔源多克隆抗体，并对制备的多抗进行效价检测及鉴定。对G6P[1]型BRV毒株NCDV进行不同病毒接种量及收毒时间优化，确定病毒在MARC-145细胞中的最佳培养条件；以1×10~7 TCID_(50) NCDV活毒作为免疫原免疫成年兔，制备兔源多克隆抗体；通过间接ELISA检测多抗效价，并通过间接免疫荧光试验(IFA)及中和试验鉴定其特异性。结果：NCDV毒株以感染比0.1、感染时间24 h为最佳培养条件，病毒滴度可至4.9×10~6 TCID_(50)/mL;间接ELISA结果显示，多克隆抗体的效价为1∶51 200,表明NCDV具有良好的免疫原性；IFA及中和试验结果表明，NCDV多克隆抗体与G6P[1]型、G9P[1]型和G10P[11]型BRV毒株均能发生特异性反应，存在良好的交叉中和效应，表明制备的多抗具有良好的反应性。综上，本试验成功优化了NCDV毒株在MARC-145细胞中的增殖条件，并制备了高效价的兔源多克隆抗体，为后续BRV感染的血清学诊断及疫苗研发奠定了理论基础。

关键词

牛轮状病毒 / NCDV毒株 / MARC-145细胞 / 多克隆抗体