邯郸市猫疱疹病毒HD1株的分离与鉴定

摘要

为了探究猫疱疹病毒(FHV)在邯郸地区的分子流行病学特征，从邯郸地区不同动物医院收集到有呼吸道症状猫的眼、鼻分泌物共55份，经PCR初检后，将阳性样本接种于猫肾细胞(CRFK),细胞产生病变，经过蚀斑纯化、分子生物学检测、血清学鉴定、病毒形态鉴定，得到1株FHV。用gD基因引物扩增FHV分离株基因后能够得到特异性条带，且经过3轮蚀斑纯化后，得到1株亚克隆毒株，命名为FHV HD1。FHV HD1 P3代在CRFK上的病毒滴度为10~6 TCID_(50)/100μL,并检测生长过程中8个时间点的病毒滴度，绘制分离株生长曲线。使用FHV-1特异性抗体进行间接免疫荧光检测，结果FHV HD1能够出现特异性荧光。BLAST分析表明FHV HD1株gD基因与其他FHV-1相似性达98.25%～99.91%。进化树分析表明与猫科动物源FHV-1亲缘关系较近，处于同一大分支，与犬疱疹病毒和其他动物疱疹病毒亲缘关系较远。本研究结果为FHV的进化分析和现阶段疫苗研发奠定了基础，对猫病毒性鼻气管炎的病原学、免疫学、临床诊断及分子生物学的研究具有重要参考价值。

关键词

猫疱疹病毒1型 / 分离鉴定 / 生长动力学 / gD基因