稳定表达绿色荧光蛋白的盖塔病毒的构建与鉴定

姜智文; 秦颖; 陈杰; 粟硕

畜牧与兽医 ›› 2025, Vol. 57 ›› Issue (03) : 74 -78.

姜智文, 秦颖, 陈杰, 粟硕

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摘要

为了开发表达外源基因的重组盖塔病毒，通过反向遗传技术，在盖塔病毒nsP3基因的C端插入绿色荧光蛋白ZsGreen,并通过转染至BHK-21细胞拯救重组病毒并研究其生长特性。结果：感染性cDNA克隆pSM-GETV-nsP3/ZsGreen转染BHK-21细胞后表达绿色荧光蛋白，所拯救的报告病毒可以在BHK-21细胞上稳定传代(至少10代),并表现出良好的遗传稳定性；多步生长曲线试验表明，报告病毒GETV-ZsGreen在BHK-21细胞上的增殖能力略低于亲本毒株，但仍能达到较高病毒滴度。综上，本研究构建并拯救了1株遗传稳定的GETV报告病毒GETV-ZsGreen。