猫杯状病毒NS2蛋白的截短表达及多克隆抗体的制备与应用

董宁宁; 张琦; 谈晓梅; 李娜; 朱雯琪; 刘光清; 孟春春

畜牧与兽医 ›› 2025, Vol. 57 ›› Issue (02) : 78 -83.

董宁宁, 张琦, 谈晓梅, 李娜, 朱雯琪, 刘光清, 孟春春

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摘要

旨在鉴定并深入研究NS2蛋白在猫杯状病毒(FCV)感染中的作用。根据FCV SH2014株的基因序列，利用生物信息学技术对NS2蛋白进行了分析，将其在110 aa处截短为2个基因片段(NS2-N和NS2-C),将2个NS2-N相连接。筛选出成功表达的重组蛋白，使用弗氏佐剂乳化后免疫新西兰大白兔。通过Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)验证多克隆抗体的特异性识别能力。结果：成功构建了pET-32a-NS2-N和pET-32a-NS2-N-N重组质粒，并在上清液和包涵体中稳定表达了预期大小的重组蛋白。制备的多克隆抗体能特异性识别多个病毒株的NS2蛋白。结论：成功制备兔抗NS2蛋白的多克隆抗体，为深入研究FCV NS2蛋白的结构和功能提供了试验材料，为进一步阐明该病毒的致病机制奠定基础。