稀释液添加不同抗氧化剂对冷冻姜曲海猪精子质量的影响

王琳琳; 李乐康; 戴乾; 魏春来; 孙雨迪; 张婉蓉; 谭菊; 武彩红

畜牧与兽医 ›› 2024, Vol. 56 ›› Issue (11) : 10 -15.

王琳琳, 李乐康, 戴乾, 魏春来, 孙雨迪, 张婉蓉, 谭菊, 武彩红

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摘要

旨在探究稀释液中添加不同抗氧化剂对冷冻姜曲海猪精子的保护作用。采用精子直线运动检测精子活力，异硫氰荧光素标记的花生凝集素(FITC-PNA)染色检测精子顶体完整性，碘化丙啶(PI)染色检测精子质膜完整性，体外受精和培养检测受精卵的卵裂情况，透射电镜观察精子超微结构，评价冷冻保存对精子质量的影响；对姜曲海猪精液分别冷冻保存1周、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月，观察冷冻保存时间对精子质量的影响；在稀释液中分别添加抗氧化剂甲磺酸米托醌(MitoQ),2,4-二硝基酚(DNP)和4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-烃氧基(Tempol),每种抗氧化剂均添加25、50和100μmol/L 3种浓度，以筛选出冷冻保存效果最优的抗氧化剂；对添加50μmol/L MitoQ的解冻精子进行透射电镜观察。结果显示：精子冷冻保存不同时间后，各指标均无显著差异(P>0.05);添加不同浓度的MitoQ、DNP和Tempol均对冷冻保存1周精子的活力、顶体完整率、质膜完整率和体外受精卵裂率有一定的改善作用，但以添加50μmol/L MitoQ效果最好；添加50μmol/L MitoQ对精子质膜、线粒体和微管等结构均具有一定的冷冻保护作用。综上，稀释液中添加50μmol/L MitoQ对于超低温保存姜曲海猪精液具有潜在的保护优势，具有一定的开发价值。