禽致病性大肠杆菌菌蜕的制备及裂解条件优化

摘要

旨在制备禽致病性大肠杆菌菌蜕，并优化制备条件。将温控型表达质粒pBV221-E通过电击的方式，电转化入12株禽致病性大肠杆菌分离株中，通过改变温度诱导E基因表达来裂解细菌制备菌蜕；同时探究了不同起始诱导A₆₀₀值（0.4、0.5、0.6）对裂解效率的影响，优化制备条件提高裂解效率，并评估禽致病性大肠杆菌菌蜕的免疫保护力。结果：不同菌株的裂解效率有较大差异，在起始诱导A₆₀₀值为0.5时，禽致病性大肠杆菌D78菌蜕的裂解效率最高，可达约98.00%;经透射电镜观察发现，制备获得的菌蜕表面有明显孔道，细胞质从孔道溢出，菌体电子密度下降；免疫效力评估试验显示，SPF鸡经肌肉注射D78菌蜕疫苗，二免14 d后，通过气囊注射攻毒，D78菌蜕疫苗的免疫保护率为66.67%,优于D78甲醛灭活疫苗。研究结果为新型禽致病性大肠杆菌疫苗的研发奠定了基础。

关键词

菌蜕 / 禽致病性大肠杆菌 / E基因 / 裂解效率