一株羊源高产纤维素酶枯草芽胞杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

摘要

旨在筛选潜在高产纤维素酶的益生菌并探究其益生作用以期用于生产实践。从绵羊肠道内容物中，利用羧甲基纤维素钠(CMC-Na)平板筛选产纤维素酶菌株，测定其纤维素酶活性，筛选出目标菌株；采用形态学分析、生化试验和16S rDNA序列分析对目标菌株进行鉴定；进一步探究其生长曲线、产蛋白酶及α-淀粉酶能力、抑制病原菌能力、耐酸耐胆盐能力、药物敏感性和宿主安全性。结果：从样品中筛选获得8株产纤维素酶菌株，根据透明圈和菌落直径比值以及纤维素酶活性筛选获得产纤维素能力最强的菌株ECL1.2,其羧甲基纤维素酶活性为18.61 U/mL,经鉴定为枯草芽胞杆菌；ECL1.2在培养12 h后进入对数生长期，在培养26 h时进入稳定期；其蛋白酶和α-淀粉酶活力分别为2.08 U/mL和19.7 U/mL;可抑制大肠杆菌、肠炎沙门菌和金黄色葡萄球菌的生长；在pH值为2～7培养4 h及胆盐浓度为0.1%～0.3%培养8 h条件下存活率大于60%,具有一定耐酸耐胆盐性；除对林可霉素低敏、对庆大霉素中敏外，对青霉素、头孢唑啉、克拉霉素、诺氟沙星、万古霉素、利福平极其敏感；对小鼠器官和肠道无危害，并能提高小鼠日增重和采食量。综上，枯草芽胞杆菌ECL1.2可作为潜在益生菌。

关键词

微生物发酵 / 纤维素酶 / 分离鉴定 / 生物学特性 / 益生菌

基金资助

河南省重点研发项目(221111111300); 河南省重点研发专项(231111111600)